《斑點酶聯(lián)免疫分析儀校準(zhǔn)規(guī)范》

由全國生物計量技術(shù)委員會對口負責(zé)的《斑點酶聯(lián)免疫分析儀》征求意見稿已經(jīng)起草完成?，F(xiàn)將征求意見稿發(fā)送給各位專家及委員廣泛征求意見。望在百忙之中進行評審并提出意見。請將意見寄(或發(fā)電子郵件)給全國生物計量技術(shù)委員會秘書處。

??節(jié)選該標(biāo)準(zhǔn)部分內(nèi)容：
??本規(guī)范適用于支持 96 孔板的斑點酶聯(lián)免疫分析儀的校準(zhǔn)。
??斑點酶聯(lián)免疫技術(shù)(Enzyme-linked immunospot, ELISPOT)結(jié)合了細胞培養(yǎng) 技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)的優(yōu)點，在單細胞水平檢測分泌抗體的細胞或分泌細胞 因子的細胞分泌情況，統(tǒng)計斑點形成細胞的數(shù)目(即斑點計數(shù))，從而評價機體 的細胞免疫或體液免疫功能。斑點計數(shù)是 ELISPOT 數(shù)據(jù)處理重要的一步，在 疫苗的臨床評價中，斑點酶聯(lián)免疫分析儀已經(jīng)被強制性用于 ELISPOT 中。

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?斑點酶聯(lián)免疫分析儀(以下簡稱分析儀)是對 ELISPOT 板上各孔斑點圖像 進行自動采集、分析計數(shù)的儀器，主要由成像系統(tǒng)、運動系統(tǒng)、控制處理系統(tǒng)和 顯示系統(tǒng)組成。分析時，成像系統(tǒng)獲取 ELISPOT 板上孔內(nèi)斑點圖像，然后通過 顯示系統(tǒng)進行斑點統(tǒng)計，得到該孔內(nèi)斑點總數(shù)。
??校準(zhǔn)用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 模擬斑點標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：孔位與標(biāo)準(zhǔn) 96 孔板一致，結(jié)構(gòu)如附錄 A 所示，其中 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔為定位孔;E3 孔、B6 孔、G6 孔、E9 孔內(nèi)分別 為 50 個、100 個、200 個、500 個模擬斑點，相對擴展不確定度均優(yōu)于 1.0%(k=2)。
??校準(zhǔn)項目和校準(zhǔn)方法
??示值誤差 開啟分析儀，按照使用說明書進行調(diào)試，將斑點模擬標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)放入分析儀載 物倉并固定，采用 A1 孔、A12 孔、H1 孔、H12 孔進行定位后，分別對 E3、B6、 G6、E9 孔拍照并計數(shù)，每孔重復(fù)測量 3 次，按式(1)計算每孔內(nèi)斑點個數(shù)的測 量值與標(biāo)準(zhǔn)值之間的相對示值誤差。